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大腸杆菌測定儀:大腸杆菌檢測新技術

更新日期: 2021-01-30
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大腸杆菌測定儀:大腸杆菌檢測新技術。隨著人們生活水平的提高,食品安全越來越受到重視。在不斷報道的食品安全事件中,大腸杆菌是引發這些事件的主要影響因素之一,也是判斷食品汙染程度的重要參數。因此,使用快速、可靠、簡單的方法準確檢測食品中大腸杆菌的數量是否超標非常重要。

大腸杆菌檢測新技術

氣相色譜和高效液相色譜

氣相色譜主要是對大腸杆菌進行一係列衍生化預處理後,為後麵的分析研究提供盡可能多的化學成分。大腸杆菌的汙染程度可以通過頂空氣相色譜法來分析,其原理是利用食品密封係統頂部的微生物代謝產物CO2來分析微生物。該方法對食品質量安全檢測具有重要意義。與上述傳統技術相比,該方法具有檢測速度快、靈敏度高的優點。高效液相色譜(HPLC)主要根據離子對反相色譜的原理分析核酸。高效液相色譜法主要針對DN片段的分離。長鏈DN攜帶更多的磷酸基團,因此更多的TE會與之融合,其在柱中的停留時間會增加。因為乙腈是親水性的,DN可以被它分離,在一定的變性溫度下,光譜可以顯示出明顯的吸收峰。該技術具有精度高、靈敏度高、成本低的優點,可以大大提高工作效率。

三磷酸腺苷生物發光技術

三磷酸腺苷生物發光技術是近年來發展迅速的一種微生物快速檢測方法。TP是活細胞中常見的能量代謝產物,為細胞提供各種生理活動所需的能量,其在生物體內的含量維持在一定範圍內。檢測TP含量的一種方法是熒光分光光度法,生物發光是熒光素酶催化活細胞的熒光。目前熒光素酶主要來自北美的螢火蟲,相對分子量為6.2萬。它能催化熒光素的氧化反應。該反應的終產物不穩定,並迅速分解產生熒光。與傳統的檢測方法相比,不同之處在於檢測結果可以在幾分鍾內獲得,熒光光度計便攜、使用方便,適合現場檢測。這項技術可用於檢測微小汙染物的水平以及食品加工設備及其表麵的清潔度。

聚合酶鏈反應檢測技術

PCR(聚合酶鏈式反應)早由Kleppe等人於1971年提出,並於1985年被確認為一種檢測方法。PCR檢測技術是一種聚合酶鏈式反應,采用變性-退火-延伸三個步驟,使DN基因在體外實現解鏈和解鏈,類似於體外增加和複製的一種形式。理論上,一個DN分子在2小時內可以擴增到106 ~ 109倍,用瓊脂糖凝膠電泳檢測PCR擴增產物的熒光帶。

目前,聚合酶鏈反應技術廣泛應用於生命科學的許多學科。在食品微生物檢測領域,聚合酶鏈反應可以快速檢測食品中的微生物含量。常用的有免疫聚合酶鏈反應、實時熒光定量聚合酶鏈反應、多重聚合酶鏈反應、逆轉錄聚合酶鏈反應和實時定量聚合酶鏈反應。史雲等人建立了一種檢測肉類和肉製品中大腸杆菌的雙重聚合酶鏈反應方法,但該方法需要較長的樣品純化時間,對操作人員的專業知識要求較高。

生物傳感器檢測技術

生物傳感器是基於生物化學傳感技術,以抗體、酶、細胞等為識別元件,結合信號轉換器和電子測量儀器的分析工具。目前成熟的商用傳感器包括免疫傳感器、酶傳感器、DN雜交傳感器、微生物傳感器、分子印跡傳感器等。生物傳感器具有靈敏度高、選擇性高、穩定性好、成本低等優點,可以在複雜係統中快速在線監測。目前,用於信號傳輸的方法包括聲表麵波傳輸、電化學方法和光傳輸方法。免疫傳感器和基因傳感器主要用於食品微生物檢測。原理是利用DN雜交和抗原抗體反應進行檢測,然後轉換成光信號或電信號,由儀器放大輸出。生物傳感器分子識別元件的載體可以由各種材料製成,大多數是光纖和熒光光度計。殷湧光等人利用抗體免疫吸附反應,利用一級抗體——抗原和二級抗體的夾心法,大大增加了膠體金複合抗體作為二級抗體的質量,延長了膠體金複合抗體與微生物的結合過程,放大並穩定了信號,從而顯著提高了檢測的準確性。

免疫磁珠技術

免疫磁珠技術是一種大腸杆菌的分離技術。原理是利用磁珠作為抗體載體,將磁珠與大腸杆菌結合,通過磁力實現機械運動來分離大腸杆菌。與其他細菌分離方法相比,免疫磁珠技術大大提高了樣品中致病性副溶血弧菌的檢測效率。免疫磁珠技術可以快速處理不同菌株樣品中的不同微生物,這種方法可以大大提高檢測效率。

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